枸杞多糖检测

时间：2023-03-24 01:48:40来源：food栏目：食品快速检测阅读：

　　枸杞多糖的检测方法　　1、方法原理 　　粗多糖在硫酸的作用下，水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，与苯酚　　缩合成有色化合物，用分光光度法测定样品在粗多糖含量。　　2、主要设备和仪器试剂　　枸杞多糖标准液：精确称取105℃干燥恒重的标准枸杞多糖0.1000g，置100mL容量瓶中加热蒸馏水溶解稀释至刻度，其浓度为1.0mg/mL，用稀释成浓度为0.1mg/mLd的标准工作液。　　5%苯酚溶液：取苯酚100g，沙浴蒸馏，收集180℃-182℃溜分，称取此馏分5g，用水溶解后，定容至100mL棕色容量瓶中备用（现用现配）。　　3、测定步骤3.1、最大吸收波长的选择　　精密吸取0.04mg/mL无水枸杞多糖溶1.0 　　mL，置10mL具塞试管中，加入蒸馏水使体积为2.0mL，再加苯酚试液1.0mL，摇匀，迅速滴加浓硫酸5.0mL，摇匀后放置5min，置沸水浴中加热15min，取出后冷却至室温。以蒸馏水代替糖溶液如加上法配制空白。用721分光光度计在470-510nm测定吸光度，测定最大吸收波长为490±nm。　　3.2、标准曲线的绘制　　精密吸收浓度为0.1mg/mL的枸杞多糖标准，标准工作液0、0.20、0.30、0.40、0.60、0.80mL，分别置于10mL具塞试管中，各加蒸馏水使体积为2.0mL，再加苯酚试液1.0mL，摇匀，迅速滴加浓硫酸5.0 　　mL，摇匀后放置5min，置沸水浴中加热15min，取出后冷却至室温。以蒸馏水代替糖溶液如上法配制空白。用721分光光度计，1cm比色皿，在490nm处测定吸光度，绘制葡萄糖浓度-吸光度工作曲线。结果浓度在0.010-0.04mg/mL范围内与吸光度呈现性关系。　　回归方程Y=7.52×10-3X+1.13×10-3, 　　Y=0.9997(n=6)。　　3.3、含量测定　　3.31、多糖的提取与精制　　取300mL，用氟仿多次萃取，以除去蛋白质，加活性炭1%脱色，抽滤，滤液加入95%乙醇，使含醇量达80%，静置过夜。过滤，残渣用无水乙醇、丙酮、乙醚多次洗涤，真空干燥，即得粗多糖。　　3.32、供试液的配制　　精密称取粗多糖粉末0.2000g，置于50mL容量瓶中，定容，摇匀，即得供试品溶液。　　3.33、样品含量测定　　精密度吸取供试品溶液2.0mL，按“标准曲线绘制”项下方法分别测定吸光度。4.结果计算

多糖含量（%）=（C·D）/V×100 　　式中：　　C－供试液葡萄糖浓度（mg/mL）；　　D－代试液的稀释因素；　　V－供试液体积（mL）。