中国冷链物流网

喹噁啉类药物残留分析技术——净化方法(一)

时间:2023-03-25 00:06:52来源:food栏目:食品快速检测 阅读:

 

喹噁啉类药物残留分析技术——净化方法(一)

[db:作者] / 2022-12-21 00:00

(2)净化方法

喹噁啉类药物残留分析主要采用的净化方法有液液分配(LLP) 和固相萃取(SPE) 方法。LLP 所需时间较长,而喹噁啉类药物不稳定,净化过程不易太长,所以目前最常用的方法是SPE技术。

1)液液分配(liquid liquid partition,LLP)

本类药物原形及其脱氧代谢物,直接用有机溶剂提取后,利用药物极性,采用溶剂对LLP净化。Huang等测定鸡血液、肌肉、肝脏、肾脏和脂肪中CYX及其代谢物BDCYX,提取液蒸干后,用乙腈-正己烷LLP脱脂,乙腈层再净化后用HPLC测定。CYX和BDCYX的LOQ为0.025μg/g(血浆和组织),方法回收率在73%~87%之间,日间RSD小于9.86%。Zhang等提取羊组织中CYX及其代谢物BDCYX。肌肉、肝脏、肾脏用乙酸乙酯提取,脂肪组织用乙腈提取,提取上清液蒸干,用乙腈-正已烷LLP净化,取乙腈层蒸干用甲醇复溶后HPLC测定,CYX回收率为65%~79%,日间CV为6.7%~11.1%;BDCYX回收率为70%~92%,日间CV为4.7%~15.9%;LOD为15μg/kg,LOQ为25μg/kg。

QCA和MQCA与组织结合,需要解离后提取,而解离方法决定了后续的净化步骤;另外,QCA和MQCA呈酸性,在酸性溶液中以分子状态存在,在碱性溶液中以离子态存在,这成为开发LLP方法的基础。

碱性水解后的净化过程往往涉及多次LLP, 较为复杂。Hutchinson等分析猪肝中的QCA,碱性水解液用浓盐酸中和后,用乙酸乙酯提取,提取液用0.1mol/L磷酸钠(pH8.0)LLP反萃取,经SCX SPE柱净化后,吹去氢氧化钠-甲醇洗脱液中的甲醇,用盐酸中和,再与乙酸乙酯LLP净化,乙酸乙酯层吹干复溶后,用LC-MS/MS测定。方法回收率为89%~111%,CV为0.15%~10%,CCa 和CCβ分别为0.16 μg/kg和0.27 μg/kg。Huang等测定鸡组织中CYX的代谢物QCA残留,样品经碱性水解,水解液用浓盐酸调节pH<1后,用乙酸乙酯提取,提取液再与0.5 mol/L柠檬酸缓冲液(pH8) LLP反萃取,进一步用离子排阻色谱柱净化,甲醇-水洗脱液用盐酸酸化后,再与氯仿LLP,蒸干氯仿层,用流动相溶解后,HPLC分析。鸡组织中QCA的LOQ为0.025 mg/kg(内脏组织)和0.02 mg/kg(肌肉),回收率为70%~78%,CV为7.69%~11.43%。用同样的方法,Huang等提取和净化猪和鸡组织中QCT的代谢物MQCA,样品的碱性水解液用浓盐酸调节pH<1后,用乙酸乙酯提取,提取液再与水LLP,弃去水相,乙酸乙酯层再用0.5 mol/L柠檬酸缓冲液(pH8)反萃取,反萃取液经离子排阻色谱净化后HPLC测定,LOQ为0.05 mg/kg,LOD为0.025 mg/kg,回收率为74%~84%,CV为4.5%~10.8%。

酸性水解提取液在多数情况下直接经LLP转移至有机溶剂中,再进一步处理。Della等采用偏磷酸-甲醇-水(2+20+78,v/v)水解猪肝脏中QCA,水解液用乙酸乙酯提取,乙酸乙酯提取液再用0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7)LLP反萃取,水相再经SPE净化后,GC-MS测定。方法回收率为90%~102%,CV为1.7%~8.4%,CCa和CCβ分别为32μg/kg和34μg/kg,LOD为0.2μg/kg,LOQ为0.7μg/kg。

Wu等采用5%偏磷酸-10%甲醇溶液水解提取猪肝脏中的QCA和MQCA,水解液用乙酸乙酯提取,乙酸乙酯用0.01mol/L磷酸二氢钾缓冲液(用磷酸调节pH7.0)LLP反萃取,磷酸盐缓冲液再用正己烷LLP脱脂,脱脂后磷酸盐缓冲液经SPE净化后测定。回收率为70%~110%,CV小于20%。实验发现,磷酸二氢钾缓冲液浓度从0.01~1.0mol/L(用磷酸调节pH7.0)均能达到满意回收率,但是0.01mol/L浓度萃取后杂质含量最少。Sniegocki等测定猪肉中CBX代谢物(脱氧卡巴氧、QCA)和OLQ代谢物(MQCA)。样品用含偏磷酸的甲醇水解后,再用乙酸乙酯-二氯甲烷(50+50,v/v)LLP净化提取,蒸干提取物后用含0.5%异丙醇的1%乙酸溶解,LC-MSMS测定。CCa为1.04~2.11ug/kg,CCβ为1.46~2.89μg/kg,回收率在99.8%~101.2%之间。

酶解一般在弱碱性条件下进行,酶解液往往加入酸性溶液提取并脱蛋白,酸性提取液经LLP转入有机溶剂中,然后再进一步处理。Hutchinson等测定猪肝中MQCA和QCA残留,蛋白酶解液放置室温后加入1mL浓盐酸酸化提取,提取液与乙酸乙酯LLP,乙酸乙酯萃取液再用0.1mol/L磷酸钠缓冲液(pH8.0)LLP反萃取,进一步SPE净化后,LC-MS/MS测定QCA的CC。和CCβ分别为0.4μg/kg和1.2ug/kg,MQCA分别为0.7μg/kg和3.6μg/kg。刘正才等(4用蛋白酶酶解鱼、虾、猪肉、鸡肉、牛肉、猪肝中OLQ代谢残留标识物MQCA。酶解液冷至常温后,加入0.3mol/LHCI溶液振荡提取,上清液加入正己烷LLP脱脂,下层水相再用SPE净化后,HPLC测定。MQCA平均回收率在60.7%~107%之间,RSD在4.59%~14.9%之间;6种样品的LOQ为0.3~0.5μg/kg。

上一篇:牛奶和奶粉中安乃近代谢物残留量测定线性范围和测定低限

下一篇:喹噁啉类药物残留分析技术——净化方法(二)

食品安全检测服务联系电话:13613841283

郑重声明:部分文章来源于网络,仅作为参考,如果网站中图片和文字侵犯了您的版权,请联系我们处理!

标签:

食品安全网https://www.food12331.com

上一篇:喹噁啉类药物残留分析技术——净化方法(二)

下一篇:返回列表

相关推荐

推荐阅读

图文欣赏

返回顶部